Quelques pistes pour ceux qui sont perdus
Petite correction :
La PCR n'est pas quantitative, mais qualitative, elle va te donner la réponse de savoir si une séquence ADN est présente ou non.
C'est un abus de langage pour pas perdre les non connaisseurs, en vrai on parlera de qPCR.
@kodi: la qPCR est bien quantitative. Semi-quantitative pour être exacte.
Ce n'est pas qualitatif (oui/non) mais quantitatif (CT 15, CT 20, CT 35) dans un contexte standardisé.
@newfagvIHPAfDT: oui c'est ce que j'ai dis copain.
C'est sur qu'on utilise une référence et on fait souvent un ratio, mais on considère ça comme quantitatif, on aura pas une valeur net et précise comme un dosage sanguin.
Le semi quantitatif serait plutôt du Western Blot et dans une moindre mesure la PCR sur gel, si tu satures pas les puits... Mais ca reste compliqué dans le second cas.
@kodi: non non y a carrement moyen de faire de la PCR vraiment quantitative avec un thermocycleur, faut mettre une gamme d’ADNc sur la plaque. Pas fait couramment (plutot methode ddCT avec housekeeping gene) mais faisable et plus precis que le gel.
@newfagvIHPAfDT: s
Si tu parles de mettre une gamme dans la plaque, je vois pas l'intérêt pour moi, après dans mon domaine j'en ai pas l’utilité. surtout qu'il te faut être sur quand ton ADNc contrôle amplifie aussi bien que ton ADNc d'intérêt, enfin y'a pas mal de contrôle a faire selon moi. Mais c'est une technique que j'utilise pas donc je pourrais pas en parler, surtout que si tu en parles il doit exister des kits ou des protocoles déjà fait
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